隨著養(yǎng)豬生產(chǎn)的發(fā)展和產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程的推進(jìn)。人們對(duì)豬人工授精重要性的認(rèn)識(shí)越來(lái)越深刻,在現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)和育種工作中,人工授精正成為一種非常重要的生產(chǎn)途徑。近年來(lái),由于大規(guī)模、高度集約化現(xiàn)代化畜牧業(yè)的出現(xiàn),更進(jìn)一步促進(jìn)了人工授精的應(yīng)用和發(fā)展。我國(guó)豬的精液稀釋、保存與應(yīng)用,在20世紀(jì)70~80年代已在全國(guó)各省區(qū)推廣應(yīng)用,并取得了良好的效果?,F(xiàn)就豬人工授精的冷凍精液稀釋配制技術(shù)簡(jiǎn)介如下,供廣大同仁參考。 1 精液品質(zhì)的檢查 采集精液后,迅速置于30℃左右的恒溫水浴中,然后取樣進(jìn)行綜合分析,確定精子是否可以用于保存或輸精。 1.1 感官檢查 ①顏色:公豬精液正常的顏色為乳白色或淡灰白色,若為其它顏色或精液中帶有血液,均為不正常顏色,說(shuō)明公豬的生殖道有炎癥或損傷;如果精液呈淡綠色,是混有膿汁;呈粉紅色,是混有血液;呈黃色,是混有尿液。顏色異常的精液應(yīng)棄之不用。 ②氣味:正常的精液一般無(wú)味或略帶腥味。如果精液的腥味很濃,或有臭味和尿味,屬不正常精液,應(yīng)棄之不用。 ③射精量:豬正常的射精量,我國(guó)的地方品種豬為150~300mL/次,外國(guó)引入品種為250~400mL/次。如果公豬的射精量過(guò)少,說(shuō)明公豬利用過(guò)度或飼養(yǎng)管理不當(dāng),應(yīng)采取措施,力求在短期內(nèi)恢復(fù)其正常的射精量。 1.2 鏡檢 ①精子的活力:精子的活力是指原精液在37℃下呈直線運(yùn)動(dòng)的精子占全部精子總數(shù)的百分率。由于其受環(huán)境因素的影響很大,為了得到客觀、準(zhǔn)確的結(jié)果,在檢查精子活力時(shí)應(yīng)在恒溫 (37~38℃)條件下進(jìn)行,避免陽(yáng)光直接照射到精液樣品上,并遠(yuǎn)離易揮發(fā)的化學(xué)物質(zhì)或消毒劑。為了保證獲得較高的受胎率,用于輸精的精液精子活力不得低于0.4,凍精解凍后的精子活力不低于0.3。 ②精子的密度:正常精液的精子密度平均為2.5億(1億~3億之間),從鏡檢中看到精子密度高的精液往往呈云霧狀?,F(xiàn)在大都借助于分光光度計(jì)、電腦處理機(jī)、數(shù)字顯示或打印機(jī)等結(jié)合進(jìn)行檢查。 2 精液的稀釋和保存 精液經(jīng)檢查合格后,尚需經(jīng)過(guò)稀釋、分裝、保存和運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程,最后用于輸精。 2.1 豬精液稀釋液的配制 常用的豬精液稀釋液種類有很多,其配方有以下幾種: ①奶粉稀釋液:奶粉9g,蒸餾水100mL。 ②葡檸稀釋液:葡萄糖5g、檸檬酸鈉0.5g、蒸餾水100mL。 ③“卡輔”稀釋液:葡萄糖6g、檸檬酸鈉0.35g、碳酸氫鈉0.12g、乙二胺四乙酸鈉0.37g、青霉素3萬(wàn)Iu、鏈霉素10萬(wàn)Iu、蒸餾水100mL。 ④氨卵液:氨基乙酸3g、蒸餾水100mL配成基礎(chǔ)液,基礎(chǔ)液70mL加卵黃30mL。 ⑤葡檸乙液:葡萄糖5g、檸檬酸鈉0.3g、乙二胺四乙酸0.1g、蒸餾水100mL。 ⑥葡檸碳乙卵液:葡萄糖5.1g、檸檬酸鈉0.18g、碳酸氫鈉0.05g、乙二胺四乙酸0.16g、蒸餾水100mL,配成基礎(chǔ)液,基礎(chǔ)液97mL加卵黃3mL。 以上幾種稀釋液除“卡輔”外,抗生素的用量為青霉素1000lu/mL、雙氫鏈霉素1000μg/mL。 2.2 國(guó)外常用的3種稀釋液的配制 ①BL-1液(美國(guó)):葡萄糖2.9%、檸檬酸鈉1%、碳酸氫鈉0.2%、氯化鉀0.03%、青霉素1000Iu/mL、雙氫鏈霉素0.01%。 ②IVT液(英國(guó)):葡萄糖0.3g、檸檬酸鈉2g、碳酸氫鈉0.21g、氯化鉀0.04g、氨苯磺酸0.3g、蒸餾水100mL,混合后加熱使之充分溶解,冷卻后通入二氧化碳約20分鐘,使pH達(dá)到6.5。 ③奶粉-葡萄糖液(日本):脫脂奶粉3.0g、葡萄糖9g、碳酸氫鈉0.24g、α-氨基-對(duì)甲苯磺酰胺鹽酸鹽0.2g、磺胺甲基嘧啶鈉0.4g、滅菌蒸餾水200mL。 2.3 精液的稀釋和稀釋倍數(shù) 稀釋之前需確定稀釋的倍數(shù)。稀釋倍數(shù)根據(jù)精液內(nèi)精子的密度和稀釋后每毫升精液應(yīng)含的精子數(shù)來(lái)確定。豬精液經(jīng)稀釋后,要求每毫升含1億個(gè)精子。如果密度沒(méi)有測(cè)定,稀釋倍數(shù)國(guó)內(nèi)地方品種一般為0.5~1倍,引入品種為2~4倍。 精液稀釋?xiě)?yīng)在精液采出后盡快進(jìn)行,而且精液與稀釋液的溫度必須調(diào)整到一致,一般是將精液與稀釋液置于同一溫度(30℃)中進(jìn)行稀釋。 2.4 精液的保存 為了延長(zhǎng)精子的存活時(shí)間,擴(kuò)大精液的使用范圍,便于長(zhǎng)途運(yùn)輸,稀釋后的精液需進(jìn)行保存。 ①常溫保存:在15~20℃室溫條件下,利用稀釋液的弱酸性環(huán)境來(lái)抑制精子的活動(dòng),減少能耗。而稀釋液中的抗菌素類藥物可以抑制微生物繁衍,減少對(duì)精子的危害,使精液得以保存,保存時(shí)間為3天左右。 ②低溫保存:在0~5℃條件下,精子的活力被抑制,降低代謝水平,減少能耗,精子的存活時(shí)間得以延長(zhǎng)。在低溫保存下,10~0℃溫度范圍對(duì)精子是一個(gè)危險(xiǎn)的溫度范圍區(qū),如果精液從常溫狀態(tài)迅速降至0℃,精子就會(huì)發(fā)生不可逆的冷休克現(xiàn)象。所以精液在低溫保存之前,需經(jīng)預(yù)冷平衡。其具體做法為:每分鐘降溫0.2℃,用1~2小時(shí)完成降溫全過(guò)程。此外,在稀釋液內(nèi)添加卵黃、奶類等物質(zhì)也可以提高精子的抗冷能力。 在農(nóng)村無(wú)冰源條件下,可以采用以下方法制造冷源: ①將食鹽40g溶于1500mL冷水中,加入氯化銨400g,裝入廣口保溫瓶?jī)?nèi),其溫度可以降至2℃左右。如果想長(zhǎng)期維持低溫,每隔2天重新添加一次氯化銨。 ②將尿素60g溶于100mL冷水中,可以降溫至5℃。如果將其溶于冰水中,可以降溫至-5℃。 ③將貯精瓶包裹結(jié)扎盛于塑料袋內(nèi),扎好袋口。將貯精塑料袋放于竹筒或竹籃等容器中,再將容器吊沉于井底保存。 |
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