導(dǎo)讀
豆粕是大豆經(jīng)浸提脫油后的副產(chǎn)品, 其蛋白質(zhì)、必需氨基酸含量較高,且組成合理、平衡,是一種優(yōu)質(zhì)的植物性蛋白源(姚琨等,2011)。但豆粕中存在胰蛋白酶抑制劑、大豆凝血素、大豆抗原蛋白(致敏因子)、脲酶、低聚糖、脂肪氧化酶、植酸及致甲狀腺腫素等多種抗?fàn)I養(yǎng)因子, 一方面使豆粕的消化率和利用率下降;另一方面對動(dòng)物的生理、生長和健康造成不良的影響, 限制了豆粕在畜禽和高檔水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用(胡瑞等,2013)。近年來,運(yùn)用微生物發(fā)酵技術(shù)將豆粕變成發(fā)酵豆粕已成為豆粕原料開發(fā)生產(chǎn)的熱點(diǎn), 市場上不斷涌現(xiàn)出各種品牌的發(fā)酵豆粕產(chǎn)品, 但是由于各工廠之間采用的發(fā)酵工藝與菌種差異很大, 導(dǎo)致其質(zhì)量千差萬別(林文輝和虞宗敢,2010)。本研究探討了市面上7 個(gè)不同廠家的發(fā)酵豆粕產(chǎn)品在理化指標(biāo)方面的異同, 為不同品質(zhì)發(fā)酵豆粕的評估提供理論依據(jù),進(jìn)而為生產(chǎn)廠家優(yōu)化其生產(chǎn)工藝提供借鑒。
1. 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
在山東某集團(tuán)飼料廠各分公司庫房抽樣發(fā)酵豆粕樣品7 份,分別編號(hào)為樣品1、樣品2、樣品3、樣品4、樣品5、樣品6 與樣品7。
1.2 測定指標(biāo)
水分:GB/T 6435-2006; 粗蛋白質(zhì):GB/T 6432-94;粗灰分:GB/T 6438-2007;酸溶蛋白(小肽):GB/T 22492-2008;KOH 蛋白質(zhì)溶解度:GB/T 19541 -2004; 揮發(fā)性鹽基氮:GB/T5009.44-2003;pH:《中華人民共和國獸藥典》三部附錄4 頁pH 值測定法; 總酸(以乳酸計(jì)):GB/T12456—2008;L-乳酸:SBA-40D 生物傳感分析儀;抗原:定性0.6%KOH-SDS-PAGE;大豆低聚糖(水蘇糖、棉籽糖、蔗糖):定性TLC 薄層層析。氨基酸含量:高效液相色譜法。每個(gè)樣品平行檢測3 次,取平均值進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。
1.3 數(shù)據(jù)處理
采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
2、結(jié)果與分析
2.1 不同廠家發(fā)酵豆粕常規(guī)指標(biāo)含量
從表1可以看出,7 個(gè)樣品的水分含量為9.74%~11.35%, 水分之間的差異主要與不同廠家烘干工藝與烘干參數(shù)有關(guān), 產(chǎn)品之間水分差異導(dǎo)致蛋白質(zhì)含量有所不同,7 個(gè)發(fā)酵豆粕樣品粗蛋白質(zhì)含量為49.05% ~ 50.94%,差異不大,極差為1.89%。正常發(fā)酵豆粕產(chǎn)品粗灰分在7%以下,4 號(hào)樣品的粗灰分達(dá)到7.12%,分析可能與摻入其他非豆粕蛋白類物質(zhì)有關(guān)。以乳酸菌為主的厭氧發(fā)酵豆粕工藝,在豆粕發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生乳酸,發(fā)酵豆粕成品pH值一般都低于5.0,7 個(gè)樣品的pH 值為4.55~4.93,可以確定7 個(gè)不同廠家采用的發(fā)酵菌種都以乳酸菌為主。
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豆粕通過微生物的降解, 可產(chǎn)生具有特殊功能的營養(yǎng)小肽。小肽具有吸收快、能耗低、效率高、載體不易飽和等優(yōu)點(diǎn), 還能賦予產(chǎn)品特殊生理活性,如促生長、調(diào)節(jié)免疫、促進(jìn)礦物質(zhì)吸收等(李建,2009)。7 個(gè)樣品的小肽含量為12.53%~17.18%,差異較大,極差達(dá)到了4.65%。
正常發(fā)酵豆粕產(chǎn)品的蛋白質(zhì)溶解度為70%~80%。蛋白質(zhì)溶解度過低可以確定是采用高溫烘干工藝, 高溫烘干工藝使發(fā)酵豆粕中的糖和蛋白質(zhì)變性,發(fā)生美拉德反應(yīng),破壞產(chǎn)品營養(yǎng)特性,降低產(chǎn)品在動(dòng)物體內(nèi)消化率;蛋白質(zhì)溶解度過高,說明發(fā)酵豆粕過生,也不利于動(dòng)物的利用。7 個(gè)樣品的KOH 蛋白質(zhì)溶解度含量為66.02% ~ 90.70%,含量差異較大, 極差為24.68%,1 號(hào)、2 號(hào)與7 號(hào)樣品KOH 溶解度在正常范圍內(nèi), 其余樣品均存在異常。
7 個(gè)樣品總酸含量都在3.1%以上,總酸含量均較高。乳酸可以抑制微生物的生長,降低胃內(nèi)的pH值,起到活化消化酶、改善氨基酸消化能力的作用,并可促進(jìn)腸道上皮的生長。7 個(gè)樣品的L-乳酸含量在2.5% ~ 3.70%,差異也比較明顯,主要與不同廠家的發(fā)酵工藝與發(fā)酵菌種有關(guān)。
2.2 不同廠家發(fā)酵豆粕寡糖TLC 定性檢測
豆粕中的寡糖是一類抗?fàn)I養(yǎng)因子, 是大豆中低分子量糖類的總稱,主要是蔗糖、棉籽糖與水蘇糖等。豆粕中的寡糖被微生物利用后能產(chǎn)生CO2、H2、CH4等氣體,從而導(dǎo)致動(dòng)物胃腸脹氣、不適,引起滲出性腹瀉。少量寡糖對動(dòng)物腸道中益生菌的繁殖有利,但豆粕中寡糖含量較高,通過微生物發(fā)酵處理,分解去除豆粕中部分寡糖,更有利于動(dòng)物腸道的健康(張克順,2013)。
運(yùn)用TLC 薄層層析法定性檢測發(fā)酵豆粕樣品寡糖去除情況, 條帶越淺說明發(fā)酵過程中寡糖去除越好,由圖1 可以看出,2 號(hào)、6 號(hào)與7 號(hào)樣品寡糖去除情況較差, 其余4 個(gè)樣品寡糖去除情況較好。
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注:從左至右依次為豆粕,發(fā)酵豆粕樣品1~7。 圖1 不同廠家發(fā)酵豆粕寡糖TLC 定性分析
2.3 不同廠家發(fā)酵豆粕抗原0.6%KOH-SDSPAGE定性分析
豆粕中的抗原蛋白具有抗原性和致敏性,抗原刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體,導(dǎo)致腹瀉和生長受阻。通過0.6% KOH-SDS-PAGE 定性分析7 個(gè)不同樣品的抗原去除情況, 條帶越淺說明發(fā)酵過程中抗原蛋白去除的越好, 由圖2 可以看出,1 號(hào)、4 號(hào)與6 號(hào)樣品抗原蛋白去除情況良好,相對于其他樣品和豆粕原料,所有條帶都比較淡,其余樣品抗原去除情況較差。
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注:從左至右依次為豆粕,發(fā)酵豆粕樣品1~7。 圖2 不同廠家發(fā)酵豆粕抗原0.6%KOH-SDS-PAGE 定性分析
2.4 不同廠家發(fā)酵豆粕18 種氨基酸含量
由表2 可知,賴氨酸為豆粕中最主要的氨基酸,且為動(dòng)物第一限制性氨基酸,發(fā)酵豆粕行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,成品賴氨酸含量≥2.5%即可,7 個(gè)樣品中4 號(hào)樣品的賴氨酸含量最高,達(dá)2.97%,含量最低的為6 號(hào)樣品,含量為2.75%,都符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。蛋氨酸是飼料的第二限制氨基酸,蛋氨酸不僅是營養(yǎng)所需,而且它可以抑制各種霉毒素(例如黃曲霉毒素)的生長,7 個(gè)樣品中4 號(hào)樣品的蛋氨酸含量最高,達(dá)0.66%,含量最低的為1 號(hào)樣品,含量為0.51%。蘇氨酸是大麥、小麥、高粱的第二限制性氨基酸,是玉米的第三限制性氨基酸,7 個(gè)樣品中2 號(hào)樣品的蘇氨酸含量最高,達(dá)1.91%,含量最低的為6 號(hào)樣品,含量為1.81%。
由圖3 可知, 飼料中粗蛋白質(zhì)包括真蛋白質(zhì)和非蛋白含氮化合物, 后者又可能包括游離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等;7 個(gè)樣品中,總氨基酸量占粗蛋白質(zhì)含量百分率,5 號(hào)樣品所占百分率最高, 達(dá)96.85%,6 號(hào)樣品所占百分率最低,僅為93.19%
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3 討論與分析
豆粕發(fā)酵去除抗?fàn)I養(yǎng)因子、提高益生功效,在市場需求旺盛、廠家產(chǎn)能不足的情況下,出現(xiàn)“配方發(fā)酵豆粕”,即根據(jù)需求配制不同指標(biāo)的產(chǎn)品,添加不同的原料,嚴(yán)重影響產(chǎn)品的效果及應(yīng)用價(jià)值。
豆粕原料水分含量為12%~13%,蛋白質(zhì)含量為46%,從檢測數(shù)據(jù)來看,50%蛋白質(zhì)的發(fā)酵豆粕水分一般低于10%,所以蛋白質(zhì)的提升主要來源于水分的蒸發(fā), 這部分能耗并不能使產(chǎn)品使用價(jià)值提高,建議在不影響配方營養(yǎng)成分前提下,盡可能使用高水分發(fā)酵豆粕,弱化蛋白質(zhì)指標(biāo)。豆粕原料中抗?fàn)I養(yǎng)因子一直存在, 發(fā)酵過程中微生物利用、分解絕大部分寡糖、抗原,但不能全部消耗,生產(chǎn)“零抗原”發(fā)酵豆粕很難實(shí)現(xiàn),采購方過度追求這個(gè)指標(biāo)會(huì)進(jìn)一步導(dǎo)致“配方發(fā)酵豆粕”的滋生,最終損害消費(fèi)者利益。
發(fā)酵過程會(huì)帶來部分生物酸, 主要以乳酸為主,該酸的總量與原料中的糖的含量相關(guān),豆粕中寡糖的含量為1%~2%,全部轉(zhuǎn)化為乳酸的總量為2% ~ 3%, 高于該值的酸有可能來源于外加酸。發(fā)酵豆粕指標(biāo)檢測應(yīng)當(dāng)結(jié)合各項(xiàng)指標(biāo)綜合進(jìn)行,遵循生物學(xué)規(guī)律,過分追求一些難以實(shí)現(xiàn)的生物指標(biāo)容易導(dǎo)致“配方發(fā)酵豆粕”滋生。
影響發(fā)酵豆粕質(zhì)量的關(guān)鍵因素主要包括豆粕原料的質(zhì)量、發(fā)酵菌種的選擇和配伍、發(fā)酵工藝與參數(shù)等(馬文強(qiáng)等,2008),但最重要的是明確豆粕發(fā)酵的根本目的與使用對象。傳統(tǒng)的發(fā)酵豆粕產(chǎn)品主要針對畜禽,尤其是仔豬飼料,其主要目的在于消除寡糖與抗原蛋白、增強(qiáng)適口性,提高飼料消化率,替代昂貴的動(dòng)物蛋白原料。
本研究結(jié)果表明,7個(gè)不同廠家的發(fā)酵豆粕產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量差異不大,基本為50%,而小肽含量、KOH 蛋白質(zhì)溶解度與L-乳酸含量差異較大,寡糖與抗原去除情況參差不齊,氨基酸組成也有顯著區(qū)別, 說明各個(gè)廠家之間采用的發(fā)酵工藝存在較大差別。因此,建議相關(guān)發(fā)酵豆粕廠家結(jié)合影響發(fā)酵豆粕質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行生產(chǎn)工藝改進(jìn),以提高產(chǎn)品質(zhì)量。
來源:中國飼料
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