一、用途與原理
啤酒醇母是一種單細胞微生物,細胞呈圓形或卵形,細胞大小為(3~7)μm×(5~10)μm。啤酒醇母含水量為75%~85%,干物質(zhì)為15%~25%。啤酒酵母細胞壁主要成分為葡聚糖,細胞內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)、核酸、維生素、碳水化合物、類脂物質(zhì)、礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)成分,干燥酵母的主要營養(yǎng)成分見表1。
表1 干酵母的主要營養(yǎng)成分
成分 蛋白質(zhì) 脂肪 灰分 粗纖維 碳水化合物 水分
含量/% 40~50 1。5 7 1。5 30~35 5~7
此外,啤酒酵母還富含B族維生素,例如維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12,以及麥甾醇、煙酸、葉酸、泛酸、肌醇等生理活性物質(zhì),其中麥甾醇和硒的含量較為豐富。自20世紀80年代開始,我國啤酒工業(yè)崛起,如今我國已經(jīng)成為世界啤酒生產(chǎn)大國。
啤酒生產(chǎn)過程中,主發(fā)酵和后發(fā)酵工序產(chǎn)生大量的泥狀酵母,稱為酵母泥,一般為啤酒產(chǎn)量的2%~3%,全國一年可產(chǎn)生20萬~25萬噸。
酵母泥是由啤酒和酵母細胞組成的泥漿狀混合物,營養(yǎng)豐富,酵母蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值見表2。
表2 酵蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值
蛋白質(zhì)源 生物價/% 可消化率/% 凈蛋白質(zhì)利用/%
蛋 100 97 97
奶 93 97 90
燕麥粉 79 60 47
碎玉米 72 76 55
馬鈴薯 69 74 51
啤酒酵母(干) 52~87 70~90 36~78
啤酒酵母(1次生長)70~80 91~92 64~82
除酵母蛋白質(zhì)以外,酵母金屬硫蛋白(MT)也是一類低分子量、富含半胱氨酸、能被金屬誘導產(chǎn)生的金屬結(jié)合蛋白。主要參與微量元素的儲存、運輸和代謝,具有清除羥基自由基、拮抗電離和非電離輻射及重金屬解毒等多種生理功能。
酵母中谷胱甘肽含量高達1%,高谷胱甘肽酵母中該物質(zhì)含量高達8%。谷胱甘肽參與體內(nèi)的氧化還原反應、激活SH酶和提高含F(xiàn)e2+酶活性等作用,是一種重要的生化藥物。谷胱甘肽可縮短面團混捏時間及存放時間;作為抗氧化劑,可延長油炸食品的保存時間,提取物比單獨使用谷胱甘肽效果更好;作為飼料添加劑,保護動物肝臟功能,改善魚類生長,增加牛奶產(chǎn)量。
酵母中B族維生素含量高達2%,B族維生素也是重要的生化藥物,具有多種重要的生物學功能,例如糖代謝、氨基酸代謝、轉(zhuǎn)甲基作用等。
酵母中也含有較高水平的麥角固醇,麥角固醇是維生素D的前體物質(zhì),在紫外光照射下轉(zhuǎn)化成維生素D。
酵母細胞壁多糖含量達到30%~35%,具有促生長、抗病毒、增強免疫、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)環(huán)境、促進免疫器官發(fā)育的作用。
綜上所述,酵母中有利用價值的物質(zhì)主要有蛋白質(zhì)、RNA、谷胱甘肽、酵母多糖、維生素等。將啤酒酵母用清水反復洗滌、離心,除去啤酒類物質(zhì),獲得酵母菌體;將菌體用弱堿處理,使其中的啤酒花類物質(zhì)皂化脫苦,獲得脫苦酵母;用糖苷酶、蛋白酶、稀強堿低溫處理等破壞酵母細胞壁,使其細胞內(nèi)容物滲出,滲出物中RNA經(jīng)過細胞及外加核酸酶的降解生成核苷酸,再經(jīng)過脫氨酶等處理,生成鳥苷酸和肌苷酸;蛋白質(zhì)經(jīng)過蛋白酶水解產(chǎn)生肽及氨基酸;多糖經(jīng)過糖苷酶水解產(chǎn)生還原糖;還原糖與水解生成的氨基酸或肽發(fā)生美拉德反應,產(chǎn)生強烈的肉類風味;制備酵母提取物后的酵母細胞壁殘渣,用強堿或高溫高壓處理,獲得β-葡聚糖提取物,經(jīng)過乙醇沉淀、干燥獲得β-葡聚糖。
二、酵母生化產(chǎn)品制備
1,6-二磷酸果糖(FDP)、谷胱甘肽(GSH)、RNA及酵母蛋白等均屬于生化制品,在生物工程、醫(yī)藥衛(wèi)生等行業(yè)中有廣泛應用。現(xiàn)分別介紹如下:
1.1,6-二磷酸果糖(FDP)制備
1,6-二磷酸果糖(FDP)臨床廣泛用于急性心肌梗死、心肌缺血且有降低凝血和溶血作用,藥用價值極高,市場售價很高。利用啤酒酵母內(nèi)酶系生產(chǎn)1,6-二磷酸果糖(FDP)可明顯降低制備成本,是一項有開發(fā)前景的新技術(shù)。
(1)工藝流程
酵母菌體--→復壯菌體--→發(fā)酵FDP--→FDP
提取液--→上清液--→純化SOD--→SOD凍干粉
?。?)主要指標
FDP含量≥98%,水分含量(包括結(jié)晶水)24%~28%,重金屬及微生物指標合格。
2.酵母過氧化物歧化酶(SOD)制備
過氧化物歧化酶(SOD)是廣泛存在于動物、植物和微生物中的金屬酶,是一種高附加值產(chǎn)品。其主要功能是"一清四抗"即清除體內(nèi)多余的自由基,"四抗"為抗腫瘤、抗疲勞、抗病及抗衰老。目前主要用于保健品、化妝品、牙膏及出口。例如添加SOD的化妝品具有明顯抗衰老、去褐斑等功效。
(1)工藝流程(見1工藝流程)
?。?)主要指標
SOD凍干粉為白色粉末,其比活力為3048U/mg蛋白質(zhì)。
3.廢啤酒酵母發(fā)酵谷胱甘肽制備
谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的活性三肽,又稱為還原型谷胱甘肽(GSH),廣泛存在于生物體內(nèi),是重要的抗氧化劑,參與細胞內(nèi)的多種反應。例如保護蛋白質(zhì)巰基,維持其活性;防止脂質(zhì)氧化、解毒、保護皮膚。臨床上谷胱甘肽用于治療肝臟疾病、有機物及重金屬中毒、癌癥治療造成的藥物性損傷及白內(nèi)障等。
谷胱甘肽的生產(chǎn)方法主要有生物提取法、發(fā)酵法、化學合成法及酶法等,其中發(fā)酵法是生產(chǎn)谷胱甘肽最具潛力的方法。
(1)工藝流程
菌種復壯→發(fā)酵培養(yǎng)→分離菌體→提取→除雜蛋白→脫色→濃縮→萃取→反萃取→濃縮→脫鹽→凍干→GSH粉
?。?)主要指標
白色粉末,產(chǎn)品收得率為0。19%~0。23%,GSH含量90。7%,水分5。35%。
4.金屬硫蛋白(MT)制備
在酵母菌的56個屬中,酵母屬、裂殖酵母屬、假絲酵母屬等近10個種中存在金屬硫蛋白(MT)。這些金屬硫蛋白分為四類:分別是Cu2+誘導產(chǎn)生的類似于哺乳動物的MT,如釀酒酵母;Cu2+和Cd2+鹽誘導合成的MT,類似于植物螯合肽;Cu2+誘導產(chǎn)生的既不同于哺乳動物又不同于植物螯合肽的MT;受不同金屬離子調(diào)控,Cu2+誘導時產(chǎn)生類似哺乳動物的Cu2+MT,Cd2+誘導時,則產(chǎn)生類似植物螯合肽的Cd2+結(jié)合肽。
Cu2+ 、Cd2+誘導的金屬硫蛋白具有抗Cu2+ 和Cd2+的毒害作用,可用于重金屬生產(chǎn)、加工行業(yè),作特殊保健品的原料。
(1)工藝流程
酵母菌→發(fā)酵液→菌體細胞→無細胞抽提液→部分濃縮→Sephadex G-50純化→
洗脫→DEAE-Sephadex CL-6B純化→部分濃縮→洗脫→Sephadex G-25純化→洗脫→
凍干→金屬硫蛋白凍干粉
?。?)主要指標
白色粉末,兩者均酸性氨基酸含量高,Cu/CD-MT凍干粉收得率0。04%~0。06%,不含芳香族氨基酸或含量極低。Cu2+-MT分子量為7000,每分子含4分子Cys,Cys含量為10%,結(jié)合4分子Cu2+/Cu2+-MT;Cd2+-MT分子質(zhì)量為7。5kDa,每分子含6分子Cys,Cys含量為6。8%,結(jié)合4分子Cd2+/Cd2+-MT。
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