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請教:豆粕脲酶活性PH增值法

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發(fā)表于 2008-5-22 16:05:01 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
豆粕脲酶活性PH增值法的檢測方法是怎樣的??
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發(fā)表于 2008-5-22 23:48:36 | 只看該作者

豆粕脲酶活性PH增值法的檢測方法是怎樣的??

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發(fā)表于 2008-5-23 10:44:22 | 只看該作者

PH增值法

一、原理:豆粕中的脲酶可以使尿素分解產(chǎn)生氨,使體系中PH值增大。用PH計或酸堿指示劑測定其PH變化,以判性。
二、試劑:
1、尿素GB696,分析純;
2、0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液:稱取5.0706克磷酸氫二鉀,加新煮過的蒸餾水(需冷卻)溶后轉(zhuǎn)移至500ml容量瓶,定容至刻度。
3、0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液:稱取3.40克磷酸二氫鉀,加新煮過的蒸餾水(需冷卻)溶后轉(zhuǎn)移至500ml容量瓶,定容至刻度。
4、磷酸緩沖溶液(PH7.0):取61.1毫升的試劑2與38.9毫升的試劑3混合(試劑純粹時,用此法配制,否則應(yīng)稍變更兩種溶液的比例,使混合液PH值為7.0),此溶液可保存三個月。
三、儀器:
1、PH計
2、恒溫水浴鍋
四、步驟:
稱取經(jīng)粉碎(約40目,且樣品粉碎過程中應(yīng)避免發(fā)熱)的樣品10.0克,于帶塞的錐行瓶中,加水100.0毫升,振蕩30分鐘,過濾樣液備用(宜當(dāng)天測定)。吸取2.0毫升樣液,VC與帶塞比色管總。加PH緩沖液(試劑4)8毫升,加0.2克尿素,搖勻11分鐘,放置在30±5度水浴中保溫30分鐘,同時作樣液空白,即2.0樣液,加8.0毫升緩沖液,在水浴鍋中同時保溫,管內(nèi)容物冷卻后,測定PH值。
五、計算:
脲酶活性指數(shù)=PH1-PH0
PH1:樣液對尿素分解后PH值
PH0:樣液空白管PH值
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