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我也發(fā)一份檢測(cè)方法
我也發(fā)一份檢測(cè)方法,某企業(yè)號(hào)稱(chēng)30%的小肽自己委托檢測(cè)的結(jié)果,但送檢結(jié)果只有8%左右,是家號(hào)稱(chēng)臺(tái)資的產(chǎn)品
<檢測(cè)原理及方法>
一、原理:利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑,將酶解蛋白粉中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長(zhǎng)的肽沉淀,并將其中的短鏈小肽用酸溶解出來(lái),經(jīng)離心、過(guò)濾、消化、蒸餾,測(cè)定其蛋白質(zhì)含量。本方法是參照中華人民共和國(guó)輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)大豆肽粉標(biāo)準(zhǔn)(QB/ T 2653 -2004)基礎(chǔ)上修訂而來(lái)。
二、試劑及儀器:
1)100ml燒杯;
2)10ml、25ml移液管;
3)干過(guò)濾裝置;
4)半微量粗蛋白質(zhì)測(cè)定試劑和裝置;
5)15%三氯醋酸溶液(TCA溶液);
6)4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘的離心機(jī)。
三、方法:準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品3克于100 ml燒杯中,加入15 %TCA (三氯乙酸) 溶液25 毫升,混合均勻,靜置5 分鐘。將溶液定量轉(zhuǎn)移,在4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘下離心10 分鐘后,取全部上清液,用干的濾紙過(guò)濾,準(zhǔn)確移取其濾液10ml于消化管中,按測(cè)定粗蛋質(zhì)方法消化、定容(100 ml)、移取1 0ml消化液蒸餾,測(cè)定其粗蛋白質(zhì)含量(半微量定氮法)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。
四、結(jié)果:
小 肽%(占干基)={(V-V0)×C(HCl)×6.25×0.014×2.5(25ml÷10ml)×10(100 ml÷10ml)}÷m×100%
式中: V---樣品消耗HCl的體積,ml;
V0---空白消耗HCl的體積,ml;
C(HCl)---鹽酸的摩爾濃度,mol/l;
6.25×0.014---蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù)。
m---稱(chēng)取樣品質(zhì)量,g。
小 肽%(占蛋白質(zhì))=小 肽%(占干基)÷粗蛋白質(zhì)%×100
重復(fù)性: A)、每個(gè)試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定,以其算術(shù)平均值為結(jié)果; B)、允許絕對(duì)偏差為10%;
C)、以小肽占粗蛋白質(zhì)的百分含量上報(bào)結(jié)果。 |
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