再求飼料中TBA值的測(cè)定方法一個(gè)

泥鰍

我認(rèn)為能控制的還是要控制一下，原料差別太大了．

綠緣

植物組織中丙二醛含量的測(cè)定
植物器官衰老或在逆境下遭受傷害，往往發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用，丙二醛（MDA）是膜脂過(guò)氧化的最終分解產(chǎn)物，從膜上產(chǎn)生的位置釋放出后，與蛋白質(zhì)、核酸起反應(yīng)修飾其特征；使纖維素分子間的橋鍵松馳，或抑制蛋白質(zhì)的合成。MDA的積累可能對(duì)膜和細(xì)胞造成一定的傷害。
原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂過(guò)氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色的三甲川（3,5,5-三甲基惡唑2,4-二酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。但是測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)在450nm，532nm處也有吸收。植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為100～300μg/g DW，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3＋的終濃度為0.5μmol/L。A. 直線回歸法
MDA與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm波長(zhǎng)下的消光度值為零。不同濃度的蔗糖（0～25mmol/L）與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm的消光度值與532nm和600nm處的消光度值之差成正相關(guān)，配制一系列濃度的蔗糖與TBA顯色反應(yīng)后，測(cè)定上述三個(gè)波長(zhǎng)的消光度值，求其直線方程，可求算糖分在532nm處的消光度值。UV-120型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的直線方程為：
Y532＝﹣0.00198＋0.088D450 ①
B．雙組分分光光度計(jì)法
據(jù)朗伯-比爾定律：D＝kCL，當(dāng)液層厚度為1cm時(shí)，k=D/C，k稱為該物質(zhì)的比吸收系數(shù)。當(dāng)某一溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)時(shí)，某一波長(zhǎng)下的消光度值等于此混合液在該波長(zhǎng)下各顯色物質(zhì)的消光度之和。
已知蔗糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm和532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)分別為85.40，7.40。MDA在450nm波長(zhǎng)下無(wú)吸收，故該波長(zhǎng)的比吸收系數(shù)為0，532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)為155，根據(jù)雙組分分光度計(jì)法建立方程組，求解方程得計(jì)算公式：
C1(mmol/L)=11.71D450 ②
C2(μmol/L)=6.45(D532－D600)－0.56D450 ③
式中 C1－為可溶性糖的濃度；
C2－為MDA的濃度；
D450、D532、D600分別代表450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的消光度值。
試劑
10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸，先加少量的氫氧化鈉（1mol/L）溶解，再用10％的三氯乙酸定容；石英砂。
方法
1. 實(shí)驗(yàn)材料 受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫的植物葉片或衰老的植物器官。
2. MDA的提取 稱取剪碎的試材1g，加入2ml 10％TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8ml TCA進(jìn)一步研磨，勻漿離心（4000×g）10min，上清液為樣品提取液。
3. 顯色反應(yīng)和測(cè)定 吸取離心的上清液2ml（對(duì)照加2ml蒸餾水），加入2ml 0.6%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下的消光度。
4. 計(jì)算含量
(1) 直線方程法 按公式①求出樣品中糖分在532nm處的消光度值Y532，用實(shí)測(cè)532nm的消光度值減去600nm非特異吸收的消光度值再減去Y532，其差值為測(cè)定樣品中MDA-TBA反應(yīng)產(chǎn)物在532nm的消光度值。按MDA在532nm處的毫摩爾消光系數(shù)為155換算求出提取液中MDA濃度。
(2) 雙組分分光光度法 按公式③可直接求得植物樣品提取液中MDA的濃度。
用上述任一方法求得MDA的濃度，根據(jù)植物組織的重量計(jì)算測(cè)定樣品中MDA的含量：
MDA（μmol/g FW）＝C×V/W
式中 C－MDA濃度（μＭ）；
V－提取液總體積（ml）；
W－植物組織鮮重（g）。

綠緣

可以參考一下

泥鰍

非常感謝謝謝綠緣版主！

yyt

有人說(shuō)沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn),我還真找到一分,但是不知道是否滿足大家的需要
名稱過(guò)氧化值（%）TBA值（A532/kg樣品）皂化率（%）
魚(yú)　粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
烏賊內(nèi)臟 ＜0.05 ＜1000 ＞90
蝦殼粉 ＜0.05 ＜2000 ＞80
魚(yú)　油 ＜0.05 ＜1000 ＞95
豬　油 ＜0.05 ＜1000 ＞90
混合油 ＜0.05 ＜1000 ＞85
肉　粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
肉骨粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
油渣粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
玉　米 ＜0.05 ＜1000 ＞90
麥　麩 ＜0.05 ＜1000 ＞90
花生粕 ＜0.05 ＜1000 ＞ 85
磷脂類 ＜0.1 ＜2000 ＞80
米　糠 ?。?.1 ＜1000 ＞80
芝麻粕 　＜0.1 ＜1000 ＞80
谷殼粉 ＜0.05 ＜1000 －
豆　油 ＜0.05 ＜2000 ＞95
菜　油 ＜0.05 ＜2000 ＞95
椰子油 ＜0.02 ＜1000 ＞95
如果不錯(cuò)的話,版主一定要給我獎(jiǎng)勵(lì)哦,至少加1000幣.否則下次就不再奉獻(xiàn)了

綠緣

A532/kg樣品，這個(gè)單位是什么意思?。?/td>

綠緣

沒(méi)有下載看，猜想娟版的測(cè)定方法是豬油TBA值測(cè)定的國(guó)標(biāo)方法，用于飼料原料不太合適。
如果想用的話必須現(xiàn)將脂肪抽出來(lái)，這樣就麻煩多了，呵呵

紫末

綠緣版主說(shuō)的很對(duì),比較麻煩.
采用Tarladgis(1964)的蒸餾方法測(cè)定，結(jié)果用每kg樣品中丙二醛的mg數(shù)來(lái)表示（mg/kg）。取樣品25g，加入75mgBHA磨碎，將10g磨碎的樣品用試劑I[2]和蒸餾水（1：3 v:v）混合液40ml,移至300ml長(zhǎng)頸瓶中充分混合，用4mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH=4，室溫放置30～60min，再用4mol/L鹽酸調(diào)整pH=1.3，滴加幾滴消泡劑，水蒸氣蒸餾收集200ml蒸餾液，取5ml于帶塞的試管中，加入0.02mol/LTBA溶液5ml，40℃，15h發(fā)色，在533nm處測(cè)定吸光值（ABS）。則：

TBA值（丙二醛mg/kg）=ABS×18.7×200/5×1/W

其中：W---樣品重量

綠緣

娟版方法里面的試劑I[2]指的是什么??？

紫末

我也不知道