探討一下霉菌毒素的檢測(cè)方法？

寧衡

10# xxc1963
用ELISA試劑盒可以的，液相色譜設(shè)備要求高。不過(guò)試劑盒一次最少買96樣，測(cè)的完嗎？

dongwei

[quote]引用自xxc1963 發(fā)表于 2009-9-13 22:36的內(nèi)容
能不能具體檢測(cè)毒素的種類
  色譜只要有標(biāo)準(zhǔn)品肯定沒問題，試劑盒和試紙大多是AB1。

游子吟

飼料中霉菌毒素的檢測(cè)方法主要有目測(cè)法、薄層色譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、放射免疫法、氣相色譜法及快速試紙檢測(cè)法。常用的方法為薄層色譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、快速試紙檢測(cè)法。每種方法都有其利弊和適用的條件。具體使用那種方法主要看你對(duì)毒素含量的精度要求和你的實(shí)驗(yàn)室條件而定了。

游子吟

TLC法是測(cè)定霉菌毒素的經(jīng)典方法, 是我國(guó)測(cè)定食品及飼料中霉菌毒素 的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。
如黃曲霉毒素的檢測(cè)原理：是將樣品經(jīng)過(guò)提取、 柱層析、洗脫、 濃縮、 薄層分離后, 在波長(zhǎng) 365 nm紫外光下產(chǎn)生藍(lán)紫色或黃綠色熒光, 黃曲霉毒素 B1、 B2 產(chǎn)生藍(lán)紫色熒光, 黃曲霉毒素 G1、 G2 產(chǎn)生黃綠色熒光, 并根據(jù)其在薄層上顯示的最低檢出量來(lái)確定其含量, 是一種半定量檢測(cè)技術(shù)。
優(yōu)點(diǎn)：TLC有單向展開法和雙向展開法,其中雙向展開法能進(jìn)一步除去樣品中的雜質(zhì), 提高靈敏度。TLC法由于設(shè)備簡(jiǎn)單,易于普及,所以國(guó)內(nèi)外仍在使用。
缺點(diǎn)：由于該法樣品前處理繁瑣,且提取和凈化效果不夠理想, 提取液中雜質(zhì)較多, 因而在展開時(shí)影響斑點(diǎn)的熒光強(qiáng)度, 雙向展開法雖避免了雜質(zhì)干擾,但增加了操作步驟和時(shí)間。TLC法較適合于對(duì)黃曲霉毒素的定性檢測(cè), 是研究黃曲霉毒素初期所使用的主要方法。薄層色譜法對(duì)樣品處理繁瑣, 實(shí)驗(yàn)過(guò)程復(fù)雜, 所需時(shí)間多, 易受雜質(zhì)干擾, 準(zhǔn)確性差, 對(duì)實(shí)驗(yàn)人員危害大。

游子吟

酶聯(lián)免疫吸附法的定義：是抗原(或抗體)吸附劑和用酶標(biāo)記的抗體(或抗原)與標(biāo)本中的待測(cè)物(抗原和抗體)起特異的免疫學(xué)反應(yīng), 用測(cè)定酶活力的方法來(lái)增加測(cè)定的敏感度,是一種定性或半定量的方法。
優(yōu)點(diǎn)：酶聯(lián)免疫吸附法特異性強(qiáng)、 靈敏度高、 成本低, 適于批量檢測(cè), 食品和飼料工業(yè)上可利用此方法來(lái)界定食品或飼料中黃曲霉毒素的超標(biāo)問題。關(guān)于運(yùn)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)AFTB1的檢測(cè)報(bào)道也較多,目前國(guó)外已有較成熟的檢測(cè)食品及飼料中 AFTB1 等真菌毒素的 ELISA 試劑盒出售。
缺點(diǎn)：由于酶本身的不穩(wěn)定性, 用此方法檢驗(yàn)黃曲霉毒素有可能帶來(lái)假陽(yáng)、 陰性結(jié)果, 復(fù)雜樣品受干擾, 檢測(cè)準(zhǔn)確度不高。 所以研制出的黃曲霉毒素快速測(cè)試盒多以測(cè)定最具毒性的種屬為主, 酶聯(lián)免疫吸附法的檢測(cè)精度還有待于提高。

游子吟

HPLC是近幾年發(fā)展起來(lái)的檢測(cè) AFTB1 方法,主要是用熒光檢測(cè)器檢測(cè),在適宜的流動(dòng)相條件下,采用反相 C18 柱,使多種黃曲霉毒素同時(shí)分離。文鏡采用國(guó)產(chǎn)硅鎂吸附柱層析分離純化玉米中 AFTB1, 用HPLC 法檢測(cè), 方法簡(jiǎn)便,純化效果好, 最低檢出量為0.08 ng,回收率為 92.87%,該法制柱方便,而且降低了成本。
優(yōu)點(diǎn)：李佐卿等則將免疫學(xué)技術(shù)和 HPLC法相結(jié)合采用免疫親和柱對(duì)樣品進(jìn)行凈化,AFTB1 回收率達(dá)到97.3%,相關(guān)系數(shù) r=0.999 4,最低檢出限為 6.25 pg,該法將提取、凈化、濃縮一次完成,大大簡(jiǎn)化了前處理過(guò)程提高了工作效率及方法的靈敏度,但增加了成本。高效液相色譜法靈敏、 分辨率高, 可作定性、 定量分析, 同時(shí)可檢測(cè)多個(gè)黃曲霉毒素種類, 適于大批量樣品的分析。
缺點(diǎn)：高效液相色譜法儀器設(shè)備昂貴, 技術(shù)水平要求高, 每次實(shí)驗(yàn)所使用的化學(xué)藥劑和處理途徑對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響程度差別很大, 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精度造成影響樣品還需進(jìn)行繁瑣的純化處理, 不適合快速檢測(cè)。

游子吟

快速檢測(cè)試紙的檢測(cè)采用膠體金免疫層析技術(shù)，應(yīng)用免疫層析技術(shù)檢測(cè)霉菌毒素的含量，屬于定性和半定量方法。優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，不需要昂貴的儀器設(shè)備，結(jié)果準(zhǔn)確，成本低，可以逐份檢測(cè)，30分鐘內(nèi)可以出結(jié)果，非常方便實(shí)用。適合飼料廠采購(gòu)購(gòu)買原料時(shí)快速檢測(cè)所需，也可以作為養(yǎng)殖場(chǎng)飼喂動(dòng)物時(shí)檢測(cè)霉菌毒素的一個(gè)簡(jiǎn)單的判斷指標(biāo)。

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學(xué)習(xí)、學(xué)習(xí)。本企業(yè)正需要啦。

寧衡

17# 游子吟
有沒有試紙條的經(jīng)銷電話和價(jià)格，如果有使用效果可不可以給說(shuō)說(shuō)？

游子吟

上海澳靈生物科技有限公司的霉菌毒素快速檢測(cè)試紙，你可以試試。我只是用過(guò)黃曲霉毒素的測(cè)試紙，效果還可以。其他的霉菌毒素檢測(cè)試紙，沒用過(guò)，不好說(shuō)怎么樣？具體情況你可以上網(wǎng)查查看，打電話咨詢一下。